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產(chǎn)品名稱:Bax抗體
產(chǎn)品類型:一抗
產(chǎn)品規(guī)格:0.2ml/0.1ml
產(chǎn)品應(yīng)用:科研
產(chǎn)品商標(biāo):Abcam
作用:指機體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下,由B淋巴細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白。產(chǎn)品低溫保存。
抗體來源:詳詢種屬
適應(yīng)物種:可提供抗體的各種標(biāo)記
產(chǎn)品價格:優(yōu)惠價格來電咨詢
詳細(xì)資料:參考產(chǎn)品詳詢說明
產(chǎn)品簡介:
抗體:是高等動物在抗原物質(zhì)的刺激下由漿細(xì)胞產(chǎn)生的一類能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白??贵w通常存在于血清和淋巴(組織液)中。
單克隆及多克隆抗體:由單一克隆的細(xì)胞(通常是單一克隆的雜交瘤細(xì)胞)所產(chǎn)生的識別某一抗原表位的單一抗體;多克隆抗體是由多種細(xì)胞分別接觸相應(yīng)抗原而產(chǎn)生的多種抗體的總和,多克隆抗體識別抗原的多個表位。
抗體結(jié)構(gòu):抗體是由四條肽鏈構(gòu)成的“Y”形對稱的分子,包括兩條重鏈和兩條輕鏈。在“Y”的部位的氨基酸順序在不同的抗體分子中差別很大,是負(fù)責(zé)與抗原進(jìn)行特異性結(jié)合的區(qū)域,稱為可變區(qū),余下的區(qū)域則稱為恒定區(qū)。
二、抗體分類
抗體分類:根據(jù)重鏈恒定區(qū)的血清學(xué)類型,可將抗體分為IgM,IgG,IgA,IgD,IgE五類,它們的重鏈分別為mu, gamma, alpha, delta, epsilon鏈。在上述每一類別中,按重鏈構(gòu)造上的變異又可分為幾個亞類,例如人的IgG可分為IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四個亞類。
輕鏈分為兩種類型,kappa鏈和lambda鏈,但每種抗體中只存在一種類型的輕鏈。
二抗:二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學(xué)實驗中得以應(yīng)用廣泛,如western blot(通過與特異性抗體結(jié)合來鑒定蛋白質(zhì)),ELISA(以耦聯(lián)有酶的抗體或抗原為標(biāo)記來檢測特異性的蛋白質(zhì),尤其是相應(yīng)的抗原或抗體),免疫組織化學(xué)(檢測組織中的特異性抗原),免疫細(xì)胞化學(xué)(通過免疫學(xué)方法檢測細(xì)胞的抗原組成),流式細(xì)胞術(shù)(通過檢測激光所激發(fā)熒光來鑒定分離不同類型的細(xì)胞)及免疫沉淀(通過抗原與抗體的特異性結(jié)合作用來分離相應(yīng)抗原)。二抗針對某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性,因而使用標(biāo)記的二抗可以免去對每一個一抗進(jìn)行標(biāo)記,大大節(jié)省了時間和費用;此外,一個一抗分子可以同時結(jié)合幾個二抗分子,從而使信號大大增強,提高了實驗靈敏度。
三、操作流程
染色質(zhì)免疫沉淀的流程示意圖
染色質(zhì)免疫沉淀
染色質(zhì)免疫沉淀(CHIP)初是在20世紀(jì)80年代研究RNA聚合酶II與靶基因相互作用的過程中發(fā)展起來的 [1] 。在此過程中,細(xì)胞被固定在甲醛或類似的固定劑中以使細(xì)胞DNA和相關(guān)蛋白分子發(fā)生交聯(lián)。固定的細(xì)胞隨后經(jīng)超聲處理,使細(xì)胞中的DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物斷裂為100-300 bp的片段,然后用結(jié)合在DNA上的特異性蛋白(如組蛋白和轉(zhuǎn)錄因子)的抗體,按照標(biāo)準(zhǔn)方法免疫沉淀相關(guān)的DNA片段。后,通過去交聯(lián)分離DNA-蛋白復(fù)合物,再行PCR分析結(jié)合在蛋白上的DNA片段。理想情況下,標(biāo)準(zhǔn)的CHIP法是用來驗證某個蛋白和某個假定的靶基因之間的相互作用,因為要根據(jù)假定的靶基因序列設(shè)計特異性PCR引物(圖7)。
CHIP法有個局限性,即交聯(lián)步驟可能會破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),從而阻礙抗體與其結(jié)合,影響后續(xù)的免疫沉淀。此時,可以嘗試無交聯(lián)步驟的CHIP法;此過程稱為N-ChIP的免疫沉淀法 [1, 2] 。盡管去交聯(lián)提高抗原識別能力,但是一般只適用于目標(biāo)蛋白強烈地結(jié)合在DNA上這種情況。
近,芯片被改良以用于高通量分析。例如,ChIP-on-Chip結(jié)合了CHIP法和微陣列技術(shù),適用于熒光標(biāo)記序列的全基因組篩選。在這些檢測中,用不同的熒光染料標(biāo)記沉淀組DNA和對照組DNA(通常不經(jīng)沉淀的總輸入),然后用各組DNA與DNA微陣列芯片甚至整個基因組小寡核苷酸進(jìn)行雜交。通過標(biāo)準(zhǔn)化分析技術(shù),可以從芯片獲得CHIP樣品相對于DNA對照組的DNA結(jié)合位點的詳細(xì)信息。
染色質(zhì)免疫共沉淀測序
將染色質(zhì)沉淀技術(shù)與現(xiàn)代高通量測序技術(shù)相結(jié)合,從而有利于鑒定前所未知的靶基因序列。由于高通量測序可以鑒定和提供大量的基因組信息,因此染色質(zhì)免疫共沉淀測序適用于整個基因組的染色質(zhì)免疫沉淀檢測 [3] 。
類似于染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)用來分析DNA-蛋白質(zhì)的相互作用,交聯(lián)免疫沉淀技術(shù)可用于分析RNA-蛋白質(zhì)的相互作用[4] 。染色質(zhì)免疫共沉淀測序的方法的類似于染色質(zhì)免疫沉淀;然而,因為目標(biāo)核酸不同,因此也存在幾個明顯的差異。在染色質(zhì)免疫共沉淀測序中,推薦使用的交聯(lián)劑是紫外線照射。由于轉(zhuǎn)錄組RNA一般較短,所以不需要經(jīng)過超聲處理,細(xì)胞可以在標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中裂解。但是必須在所有的裂解產(chǎn)物中添加RNase抑制劑以防止目標(biāo)RNA的降解 [5]。
四、儲存方式
保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.