檢測熒光的儀器:分子熒光光譜儀又稱熒光分光光度計有的場合也叫熒光光譜儀，是一種定性、定量分析的儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)，從各個角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過對這些參數(shù)的測定，不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是240~1000nm，發(fā)射波長掃描范圍是200~900nm?？蓴U展至1700nm或更遠?？捎糜谝后w、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。

熒光分光光度計結(jié)構(gòu)示意圖

熒光分光光度計的檢測原理是分子發(fā)光包括熒光、磷光、化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光和散射光譜等?；诨衔锏臒晒鉁y量而建立起來的分析方法稱為分子熒光光譜法。由光源發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光，通過激發(fā)光單色器變成單色光，此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光。被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于光電倍增管上，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀。一個激發(fā)，一個發(fā)射，采用雙單色器系統(tǒng)，可分別測量激發(fā)光譜和熒光光譜。

熒光分析法是測定物質(zhì)吸收了一定頻率的光以后，物質(zhì)本身所發(fā)射的光的強度。物質(zhì)吸收的光，稱為激發(fā)光;物質(zhì)受激后所發(fā)射的光，稱為發(fā)射光或熒光。如果將激發(fā)光用單色器分光后，連續(xù)測定相應(yīng)的熒光的強度所得到的曲線，稱為該熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜 。 實際上熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜就是它的吸收光譜。在激發(fā)光譜中吸收處的波長處，固定波長和強度，檢測物質(zhì)所發(fā)射的熒光的波長和強度，所得到的曲線稱為該物質(zhì)的熒光發(fā)射光譜，簡稱熒光光譜 。在建立熒光分析法時，需根據(jù)熒光光譜來選擇適當?shù)臏y定波長。激發(fā)光譜和熒光光譜是熒光物質(zhì)定性的依據(jù)。某些物質(zhì)的分子能吸收能里而發(fā)射出熒光，根據(jù)熒光的光譜和熒光強度，對物質(zhì)進行定性或定里的方法，稱為熒光分析法。對于某一熒光物質(zhì)的稀溶液，在一定波長和一定強度的入射光照射下，當液層的厚度不變時，所發(fā)生的熒光強度和該溶液的濃度成正比，這是熒光定量分析的基礎(chǔ)。

應(yīng)用范圍：

生態(tài)地質(zhì)研究：使用“熒光標記”方法對水文地質(zhì)過程進行研究。港口，河流和水庫水域油

品的污染源;外部因素對天然水體中油品生物降解過程的研究;水庫生物活性對葉綠素熒光

的研究；

生物應(yīng)用：包括：核酸研究，如DNA和RNA、蛋白質(zhì)研究、酶動力學(xué)、細胞研究，包括細胞內(nèi)離子測定；

科學(xué)研究：測量發(fā)光光譜特性，研究有機和無機發(fā)光物質(zhì)，發(fā)光標簽，嵌入生物物體中；

法醫(yī)檢查：油墨，紙張等的光譜特性分析對象，熒光粉，其他發(fā)光粉末的光譜純度分析；

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